Jaka jest rola sondy w teście Animal Medical PCR w czasie rzeczywistym?

Hej tam! Jako dostawcaTest medyczny PCR na zwierzętach, widziałem na własne oczy kluczową rolę, jaką sondy odgrywają w medycznych testach PCR na zwierzętach w czasie rzeczywistym. W tym poście na blogu opiszę, czym są sondy, jak działają i dlaczego są tak ważne w świecie opieki zdrowotnej nad zwierzętami.

Czym są sondy w PCR w czasie rzeczywistym?

Zacznijmy od podstaw. W reakcji PCR w czasie rzeczywistym sonda to krótka, jednoniciowa cząsteczka DNA lub RNA zaprojektowana tak, aby wiązać się z określoną sekwencją docelową w DNA lub RNA patogenu lub materiału genetycznego, który próbujesz wykryć. Sondy te są znakowane fluorescencyjnym barwnikiem reporterowym na jednym końcu i cząsteczką wygaszającą na drugim.

Gdy sonda jest nienaruszona, cząsteczka wygaszacza uniemożliwia barwnikowi fluorescencyjnemu emitowanie światła. Kiedy jednak enzym polimeraza DNA podczas procesu PCR rozbija sondę podczas replikacji docelowego DNA, barwnik fluorescencyjny zostaje uwolniony spod wpływu wygaszacza. Powoduje to wzrost fluorescencji, który może zostać wykryty przez maszynę PCR.

Jak sondy działają w medycznych testach PCR na zwierzętach w czasie rzeczywistym?

W medycznych testach PCR na zwierzętach w czasie rzeczywistym sondy służą do wykrywania określonych patogenów, takich jak wirusy, bakterie lub pasożyty, w próbkach zwierzęcych. Proces zazwyczaj rozpoczyna się od pobrania próbki od zwierzęcia, takiej jak krew, ślina lub tkanka. Próbkę poddaje się następnie obróbce w celu ekstrakcji DNA lub RNA.

Po ekstrakcji materiału genetycznego miesza się go ze starterami, sondami i innymi odczynnikami w probówce do reakcji PCR. Startery to krótkie sekwencje DNA, które wiążą się z docelowym DNA po obu stronach regionu, który chcesz amplifikować. Następnie maszyna do PCR przechodzi serię cykli temperaturowych w celu amplifikacji docelowego DNA.

W miarę amplifikacji docelowego DNA sondy wiążą się z komplementarnymi sekwencjami w amplifikowanym DNA. Kiedy polimeraza DNA rozkłada sondy, sygnał fluorescencji wzrasta. Maszyna do PCR mierzy ten wzrost fluorescencji w czasie rzeczywistym, co pozwala nam monitorować proces amplifikacji na bieżąco.

Dlaczego sondy są ważne w medycznych testach PCR na zwierzętach w czasie rzeczywistym?

Specyficzność

Jedną z największych zalet stosowania sond w testach PCR w czasie rzeczywistym jest ich wysoka specyficzność. Sondy są zaprojektowane tak, aby wiązać się z bardzo specyficznymi sekwencjami docelowymi, co oznacza, że ​​mogą dokładnie wykryć obecność określonego patogenu lub markera genetycznego. Jest to szczególnie ważne w opiece zdrowotnej nad zwierzętami, gdzie dokładna diagnoza ma kluczowe znaczenie dla skutecznego leczenia.

Na przykład, jeśli lekarz weterynarii podejrzewa, że ​​pies ma określoną infekcję wirusową, test PCR w czasie rzeczywistym z użyciem określonej sondy może z dużą dokładnością potwierdzić obecność wirusa. Dzięki temu lekarz weterynarii może przepisać odpowiednie leczenie i uniknąć niepotrzebnych leków.

Wrażliwość

Sondy sprawiają również, że testy PCR w czasie rzeczywistym są bardzo czułe. Mogą wykryć bardzo niski poziom docelowego DNA lub RNA w próbce, co jest ważne dla wczesnego wykrywania chorób. W wielu przypadkach wczesne wykrycie może prowadzić do lepszych wyników leczenia i większej szansy na wyzdrowienie zwierzęcia.

Na przykład w przypadku choroby zakaźnej wczesne wykrycie może pomóc w zapobieganiu rozprzestrzenianiu się patogenu na inne zwierzęta. Stosując test PCR w czasie rzeczywistym z czułą sondą, weterynarze mogą zidentyfikować zakażone zwierzęta, zanim zaczną wykazywać objawy i podjąć odpowiednie środki w celu powstrzymania epidemii.

Ujęcie ilościowe

Inną ważną cechą testów PCR w czasie rzeczywistym z sondami jest możliwość ilościowego określenia ilości docelowego DNA lub RNA w próbce. Nazywa się to ilościową PCR (qPCR). Mierząc sygnał fluorescencji w różnych punktach czasowych procesu PCR, możemy określić początkową ilość docelowego DNA lub RNA w próbce.

To oznaczenie ilościowe jest przydatne w wielu zastosowaniach, takich jak monitorowanie postępu choroby, ocena skuteczności leczenia lub badanie częstości występowania patogenu w populacji. Na przykład w badaniu dotyczącym konkretnego wirusa w grupie zwierząt można zastosować metodę qPCR do pomiaru miana wirusa u każdego zwierzęcia w czasie.

Zastosowania sond w medycznych testach PCR na zwierzętach w czasie rzeczywistym

Diagnoza choroby

Jak wspomniano wcześniej, sondy są szeroko stosowane w testach PCR w czasie rzeczywistym do diagnozowania chorób u zwierząt. Potrafią wykryć różnorodne patogeny, w tym wirusy (takie jak parwowirus psów i wirus białaczki kotów), bakterie (takie jak Salmonella, E. coli) i pasożyty (takie jak Toxoplasma gondii).

Dokładna i terminowa diagnoza jest niezbędna do zapewnienia odpowiedniego leczenia chorym zwierzętom. Stosując testy PCR w czasie rzeczywistym z określonymi sondami, lekarze weterynarii mogą szybko zidentyfikować przyczynę choroby i rozpocząć odpowiedni plan leczenia.

Nadzór nad chorobami

Sondy są również cenne w programach nadzoru nad chorobami. Programy te mają na celu monitorowanie częstości występowania i rozprzestrzeniania się chorób w populacjach zwierząt. Regularnie testując próbki od różnych zwierząt i lokalizacji, możemy wykryć pojawiające się choroby, śledzić rozprzestrzenianie się istniejących chorób i wdrożyć odpowiednie środki kontroli.

Na przykład w gospodarstwie hodowlanym można zastosować testy PCR w czasie rzeczywistym z sondami do monitorowania obecności powszechnych patogenów u zwierząt. W przypadku wykrycia nowego patogenu gospodarstwo może podjąć kroki zapobiegające jego rozprzestrzenianiu się, takie jak izolacja zakażonych zwierząt, poprawa środków bezpieczeństwa biologicznego lub zaszczepienie pozostałych zwierząt.

Badania

W badaniach na zwierzętach sondy w testach PCR w czasie rzeczywistym służą do badania różnych aspektów genetyki i chorób zwierząt. Można je wykorzystać do identyfikacji mutacji genetycznych, badania wzorców ekspresji genów lub badania interakcji między patogenami a ich żywicielami.

Na przykład badacze mogą wykorzystać testy PCR w czasie rzeczywistym z sondami, aby zbadać, jak dany wirus wpływa na ekspresję genów układu odpornościowego zwierzęcia. Informacje te mogą pomóc w opracowaniu nowych szczepionek lub strategii leczenia.

Nasza rola jako dostawcy testów PCR do celów medycznych dla zwierząt

Jako dostawcaTest medyczny PCR na zwierzętachrozumiemy znaczenie wysokiej jakości sond w testach PCR w czasie rzeczywistym. Oferujemy szeroką gamę sond zaprojektowanych specjalnie do zastosowań medycznych u zwierząt.

Nasze sondy są starannie projektowane i produkowane, aby zapewnić wysoką swoistość, czułość i niezawodność. Korzystamy z najnowszych technologii i środków kontroli jakości, aby zapewnić spójne działanie naszych sond w testach PCR w czasie rzeczywistym.

Oprócz sond oferujemy również inne odczynniki i zestawy doBadania laboratoryjne na zwierzętach. Z naszych produktów korzystają lekarze weterynarii, instytucje badawcze i laboratoria zdrowia zwierząt na całym świecie.

Skontaktuj się z nami w sprawie zakupów i negocjacji

Jeśli jesteś zainteresowany zakupem naszych produktów do medycznych testów PCR dla zwierząt, w tym sond, lub jeśli masz jakiekolwiek pytania dotyczące naszych produktów lub usług, nie wahaj się z nami skontaktować. Zawsze chętnie pomożemy i nie możemy się doczekać współpracy z Państwem w celu poprawy zdrowia zwierząt dzięki dokładnym i niezawodnym narzędziom diagnostycznym.

Referencje

• Bustin, SA, Benes, V., Garson, JA, Hellemans, J., Huggett, J., Kubista, M., ... i Wittwer, CT (2009). Wytyczne MIQE: minimum informacji do publikacji ilościowych eksperymentów PCR w czasie rzeczywistym. Chemia kliniczna, 55(4), 611-622.
• Mackay, IM, Arden, KE i Nitsche, A. (2002). PCR w czasie rzeczywistym w wirusologii. Badania nad kwasami nukleinowymi, 30(6), 1292-1305.
• Nolan, T., Hands, RE i Bustin, SA (2006). Kwantyfikacja mRNA za pomocą RT-PCR w czasie rzeczywistym. Protokoły przyrodnicze, 1(3), 1559-1582.